二维色谱如何帮助解决具有挑战性的高效液相色谱分离和定量?
40多年来,高效液相色谱(HPLC)一直是分析化学家不可缺少的工具。由于不同的分离机制(例如反相和正相),众多的检测器选项(ELSD, RI, UV, Corona CAD)和其他,它已经帮助分离和定量无数复杂基质中的痕量有机化合物。
我们知道高效液相色谱在大多数应用中使用单一色谱柱。但是如果用两种不同的固定相呢?
进入2D高效液相色谱:一种通过将流出物(或部分流出物)从一个色谱柱注入到另一个色谱柱来显著提高分离能力的方法。在大多数情况下,第二列将具有互补分离行为。
有两种基本的方法来执行2D HPLC:综合2D HPLC(或LCxLC)和心脏切割2D HPLC(或LC-LC)
LCxLC,完整的洗脱液将第一列的元素注入第二列。以二维方式重建峰值如下:
- 信用证1=第一色谱柱分离
- 信用证2=分离第二色谱柱基线解析宽,第三LC1峰值是通过LC实现的2列。
LC-LC,一个特定的高峰(或保留时间范围)从第一个HPLC色谱柱被选择在LC上进行二次分离2.与LCxLC相比,LC可以对特定的峰实现更大的分离2
色谱柱的选择可使色谱中某一特定峰的分离效率最大化1(例如,较长的一栏)。
2D高效液相色谱有什么好?
首先,二维高效液相色谱可以消除费时和昂贵的样品制备步骤。当化学家面临复杂基质中痕量有机化合物的极其困难的任务时,这可能是极有价值的。
2D高效液相色谱法也可用于监测复杂混合物的微小变化。这可以通过评估样本的2D地图来实现(见下文)。
总的来说,2D HPLC可以是一个完全自动化的过程和方法开发大大加快了强大的软件。





