二维(2D)色谱如何有助于解决挑战性的HPLC分离和定量?
高性能液相色谱(HPLC)已成为40多年来分析化学家的必不可少的工具。由于各种分离机制(例如,反相和正常相),许多检测器选项(ELSD,RI,UV,Corona CAD)等,它有助于无数复杂矩阵中痕量水平有机化合物的分离和定量。
我们知道HPLC将在大多数应用中与单列一起使用。但是,使用两个列的固定相呢?
输入2D HPLC:通过将废水(或一部分流出物)从一列从一列注入流出物(或一部分流出物)到第二列来大大增加分离功率的方法。在大多数情况下,第二列将具有互补的分离行为。
执行2D HPLC的基本方法有两种:综合2D HPLC(或LCXLC)和心脏切开2D HPLC(或LC-LC)
与lcxlc,完整的洗脱液第一列的注入第二列。峰以2D方式重建如下:
- LC1=第一HPLC列的分离
- LC2=宽,第三LC的第二HPLC柱子分辨率的分离1LC实现了峰值2柱子。
使用LC-LC,特定的峰(或保留时间范围)从第一个HPLC列中选择用于LC上的次级分离2。与LCXLC相比,可以将特定峰作为LC实现更大的分离2
可以选择列以最大化LC中特定峰的分离效率1(例如,更长的列)。
好吧……2D HPLC有什么好处?
首先,2D HPLC可以是消除耗时且昂贵的样本准备步骤的“去”方法。当面对化学家在复杂矩阵中量化有机化合物的非常困难的任务时,这对于化学家来说是非常有价值的。
2D HPLC也可用于监视复杂混合物的小变化。这是通过评估样品的2D地图来完成的(见下文)。
总体而言,2D HPLC可以是一个完全自动化的过程,并且使用功能强大的软件可以加快方法开发。





