凝胶渗透色谱(GPC)是一种强大的分析技术,用于分离溶解分子的大小,基于他们的洗脱柱充满多孔凝胶。它可以被描述为一种类型的分子筛分色谱,在那里样品被分离成他们的组成部分溶解在流动相(溶剂),并通过多孔柱填料。不同的组分以不同的速度通过固定相,这取决于它们进入不同孔隙的能力,导致样品在一种称为微分分配的过程中分离。
尺寸排除色谱(SEC)通常用于大分子种类(聚合物)的化学分析,也包括许多生化应用。凝胶渗透色谱法是目前测定复杂聚合物分子量分布的主要方法。这篇博文将更详细地探讨凝胶渗透色谱的工作原理。
凝胶渗透色谱概述
为了进行凝胶渗透色谱,首先使用溶剂溶解感兴趣的样品。然后,液体被连续泵入吸附剂床,吸附剂床通常由填充在柱中的多孔凝胶珠组成。较小的样品分子通过柱的多孔结构的时间更长,通过固定相的时间也更长。反之,较大的样品分子不能通过相对较小的孔,而会快速通过色谱柱。这种性质反映了单个分子的水动力体积。
洗脱的流动相分子可以使用以下任何技术检测:
- 蒸发光散射
- 傅里叶变换红外光谱法
- 低角度光散射
- 折射指数(RI)
- 直角光散射
- 紫外线(UV)
- 粘度测定法
它是可能的分析一个非常广泛的分子量使用凝胶渗透色谱法由于立柱发展广泛,专门设计了多孔聚合物填料。传统的色谱填料不适合检测大分子,因为大分子通常保留在固体多孔结构中,不能从柱上洗脱。
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经过精细调整的多孔树脂增强了色谱柱的分离能力,并可在特定分子量范围内提高分辨率。这为更可靠的聚合物分子量分析提供了更窄的分离带。凝胶渗透色谱法是目前最广泛接受的测定高分子分子量的标准之一。
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